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ELISA試劑盒血清、血漿、細胞樣本的收集及處理方法

更新時間:2021-10-18      瀏覽次數:2588

1、血清:用無菌管收集,室溫血液自然凝固10-20分鐘,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000/分),仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。

 

2、血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑抗凝劑,混合10-20鐘后,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。


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4細胞樣品前處理:

a)對于貼壁細胞:去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。

b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞量加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成50-100萬細胞/管,然后再裂解。

c)對于組織樣品: 把組織剪切成細小的碎片。按照每20mg組織加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。 (如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量)。

用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

2、后處理:

將裂解后的樣品10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續的ELISA、Western和免疫沉淀等操作。



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